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021-54845833/15800441009
黃嘌呤氧化酶抑制篩選檢測試劑盒
測定意義
測定原理
需自備的儀器和用品
測定意義
黃嘌呤氧化酶(Xanthine oxidase，XOD)是一種催化次黃嘌呤羥基化為黃嘌呤及黃嘌呤羥基化為尿酸的酶，由腎臟排泄，尿酸產(chǎn)生過多或排泄不足會導致高尿酸血癥。因此開發(fā) XOD 抑制劑可以用于治療高尿酸和通風類疾病的研究。
測定原理
黃嘌呤氧化酶（XOD)催化黃嘌呤氧化生成尿酸和超氧陰離子自由基，接著與顯色劑反應生成有色物質(zhì)，在加入抑制劑后，450nm顯色的產(chǎn)生會被抑制，根據(jù)抑制的程度來確定抑制劑的作用效果。
需自備的儀器和用品
酶標儀、臺式離心機、可調(diào)式移液器、96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
試劑組成和配制
預實驗的意義
|
試劑名稱 |
規(guī)格 |
數(shù)目 |
貯藏 |
備注 |
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試劑一 |
液體120mL |
x1 |
4℃ |
可用于提取稀釋樣品 |
|
試劑二 |
粉劑 |
x2 |
4℃,避光 |
加9mL試劑一超聲溶解，現(xiàn)配現(xiàn)用 |
|
試劑三 |
液體 |
x2 |
-20℃,避光 |
避免反復凍融 |
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試劑四 |
液體3mL |
x1 |
-20℃,避光 |
避免反復凍融 |
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試劑五 |
非布索坦 |
x1 |
-20℃,避光 |
5 mmol/L非布索坦，測定抑制率可作為參考，IC50約為3μmol/L |
預實驗的意義
比色法檢測試劑盒預實驗非常重要
1、確定該試劑盒是否適合客戶的樣本檢測，以免造成試劑盒和樣本的浪費（比如低表達處理的樣本）；
2、熟悉生化試劑盒的操作流程，尤其是初次使用生化試劑盒測定；
3、確定樣本的處理方法及稀釋倍數(shù)是否合適；
4、了解實驗過程中可能出現(xiàn)的實驗現(xiàn)象或問題，以便于及時作出調(diào)整；
5、通過3 - 5組預實驗，判斷試劑盒對于樣本的最佳適應稀釋濃度范圍，指導實驗樣本稀釋比例。
注意
正式測定前務必取 3 - 5 個預期差異較大的樣本做預測定。
