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    • 免疫熒光三標四色染色

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    免疫熒光三標四色即利用抗原抗體特異性結(jié)合原理,在同一張切片上顯示三種目標蛋白的分布和共定位情況。

    原理介紹: 酪酰胺信號放大(TSA,Tyramide signal amplification)技術(shù)是一類利用辣根過氧化酶(HRP)對靶蛋白進行標記的酶學檢測方法,類似常規(guī)免疫組化的DAB顯色方法 ,TSA技術(shù)同樣采用HRP標記的二抗,同樣有對應的“顯色”步驟(HRP催化加入反應體系的酪胺熒光素底物,產(chǎn)生活化熒光底物,活化底物可與抗原上的酪氨酸等殘基共價結(jié)合,使樣品上穩(wěn)定的共價結(jié)合酪胺熒光素。之后用熱修復法洗去非共價結(jié)合的一抗-二抗-HRP復合物,重復下一種一抗-hrp二抗來第二輪孵育,換另一種酪胺熒光素底物,如此往復就可實現(xiàn)多重標記。 

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