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    品質(zhì)保證 · 通蔚試劑

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    產(chǎn)品中心

    最新產(chǎn)品

    • 哺乳動(dòng)物源性成分探針?lè)╭PCR試劑盒

      規(guī)格:
      • 品牌 : 通蔚生物
      • 目錄號(hào) : TW-E10716
      • 應(yīng)用 : 僅限于科研使用
      • 貨期 : 1年
      • 規(guī)格 :50T
    • 商品詳情
    • 參考文獻(xiàn)
    • 說(shuō)明書(shū)下載
    • 商品評(píng)論0
    • 相關(guān)產(chǎn)品

    產(chǎn)品及特點(diǎn)

    本試劑盒可用于檢測(cè)食品或其他材料中是否有哺乳動(dòng)物源性成分?,F(xiàn)代食品加工工藝極大改變了食材原有的味道、氣味、色澤、紋理和質(zhì)地等特性,因此傳統(tǒng)的感官鑒別技術(shù)已經(jīng)無(wú)法對(duì)食材的真?zhèn)芜M(jìn)行準(zhǔn)確的鑒定。同時(shí)部分食材還有致敏性,因此基于基因檢測(cè)的快速靈敏的食材來(lái)源檢測(cè)技術(shù)將對(duì)食品監(jiān)管和安全提供重要的保障。本公司開(kāi)發(fā)了簡(jiǎn)單快捷的哺乳動(dòng)物通用源性成分探針?lè)晒舛縋CR檢測(cè)試劑盒,它具有下列特點(diǎn):

    1. 即開(kāi)即用,用戶只需要提供樣品DNA模板。
    2. 提供陽(yáng)性對(duì)照,便于區(qū)分假陰性樣品。
    3. 根據(jù)哺乳動(dòng)物保守區(qū)域設(shè)計(jì)引物和探針,能專(zhuān)一性地檢測(cè)出樣品中的哺乳動(dòng)物成分,但不能檢測(cè)其他非榛子成分。
    4. 對(duì)混合樣品中哺乳動(dòng)物成分的檢測(cè)下限為0.01%,對(duì)樣品中哺乳動(dòng)物成分的核酸檢測(cè)下限為0.1ng/μL。
    5. 既可以定性檢測(cè),也可以定量檢測(cè)。用于定量時(shí)線性范圍至少有5個(gè)數(shù)量級(jí)。
    6. 提供陽(yáng)性對(duì)照,便于區(qū)分假陰性樣品。
    7. 一管式閉管操作,降低了交叉污染。
    8. 快速,整個(gè)檢測(cè)過(guò)程(按一個(gè)樣品計(jì))所需時(shí)間僅為2.0小時(shí)。
    9. 本只能用于科研,足夠50次20μL體系的熒光定量PCR。
    10. 本產(chǎn)品只可用于科研。

    規(guī)格及成分

    成分

    規(guī)格

    包裝

    2×Probe qPCR MasterMix

    0.5mL

    0.5mL本色

    熒光PCR專(zhuān)用模板稀釋液

    1mL

    1.5mL綠蓋管

    超純水

    1mL

    1.5mL藍(lán)蓋管

    哺乳動(dòng)物源性成分qPCR引物-探針干粉

    50次

    0.5mL棕色管

    哺乳動(dòng)物源性成分qPCR陽(yáng)性對(duì)照(1×10E7拷貝/μL)

    50μL

    0.5mL黃蓋管

    使用手冊(cè)

    1份

    無(wú)

    本產(chǎn)品采用五孔盒包裝

    意:引物-探針干粉在使用前需要短暫離心,然后在離心管中加入165μL的超純水充分混勻后得到引物-探針混合液再使用,未用完的需要-20℃保存。


    使用方法

    稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品以10E1-10E6拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例
    由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照,只提供無(wú)傳染性的DNA片段作為陽(yáng)性對(duì)照。

    1. 標(biāo)記6個(gè)離心管,分別為6、5、4、3、2、1。
    2. 用帶芯槍頭分別加入45μL熒光PCR專(zhuān)用模板稀釋液,用帶芯槍頭,
    下同)。
    3. 在6號(hào)管中加入5μL1×10E7拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照(試劑盒提供),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
    4. 換槍頭,在5號(hào)管中加入5μL1×10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
    5. 換槍頭,在4號(hào)管中加入5μL1×10E5拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照(上步所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E4拷貝/μL的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
    6. 重復(fù)上面的操作得到A1-A6共六個(gè)稀釋度標(biāo)準(zhǔn)曲線陽(yáng)性樣品。放冰上待用。
    樣品DNA的制備
    7. 如果有N個(gè)樣品,設(shè)置N+2個(gè)提取,多出的一個(gè)是PC(樣品制備陽(yáng)性對(duì)照),一個(gè)是NC(樣品制備陰性對(duì)照)。可以用10μL上步所得4號(hào)稀釋液再加上一定量的水使總體積跟核酸制備試劑盒所要求的起始樣本體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。
    8. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)樣品DNA提取試劑盒兼容。也可以選購(gòu)本公司的免提取核酸釋放劑。
    Probe qPCR反應(yīng)20μL體系,在樣品制備室進(jìn)行
    9. 如果做定量分析并且只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個(gè)PCR管,其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品,1個(gè)用于PCR陰性對(duì)照(用水做模板),6個(gè)用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析并且只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+4個(gè)PCR管,其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品,1個(gè)用于PCR陰性對(duì)照(用水做模板),1個(gè)用于PCR陽(yáng)性對(duì)照(直接用第6步第4號(hào)管的陽(yáng)性對(duì)照稀釋液做模板)。下面只以定量分析為例描述操作步驟。

    數(shù)據(jù)處理
    1. 如果擴(kuò)增陽(yáng)性對(duì)照或制備陽(yáng)性對(duì)照結(jié)果為陰性,則整個(gè)擴(kuò)增或制備實(shí)驗(yàn)無(wú)效,不需要分析數(shù)據(jù),需要重做擴(kuò)增或制備或跟廠家聯(lián)系。如果擴(kuò)增陰性對(duì)照或制備陰性對(duì)照結(jié)果為陽(yáng)性,說(shuō)明環(huán)境污染,則整個(gè)擴(kuò)增或制備實(shí)驗(yàn)無(wú)效,不需要分析數(shù)據(jù),需要跟廠家聯(lián)系,購(gòu)買(mǎi)新的引物和探針。
    2. 如果陰性對(duì)照和陽(yáng)性對(duì)照正常,則實(shí)驗(yàn)有效,可以進(jìn)入后續(xù)分析。
    3. 如果把本試劑盒用于定量檢測(cè),則以陽(yáng)性對(duì)照濃度的log值為橫軸,以Ct值為縱軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。再以待測(cè)樣品的Ct值從標(biāo)準(zhǔn)曲線上推算出樣品DNA濃度的log值,再推算出其濃度。
    4. 如果把本試劑盒用于定性檢測(cè),只判斷陽(yáng)性或陰性,則陰性對(duì)照必須無(wú)Ct或Ct大于或等于40。陽(yáng)性對(duì)照必須有熒光對(duì)數(shù)增長(zhǎng),有典型擴(kuò)增曲線,Ct值應(yīng)該小于40,否則實(shí)驗(yàn)無(wú)效。如果實(shí)驗(yàn)有效,則分析待測(cè)樣品,如果無(wú)Ct或Ct大于或等于40,則為陰性。如果Ct小于40則為陽(yáng)性。

    自備試劑
    樣品DNA,超純水,核酸純化試劑盒
    運(yùn)輸及保存
    低溫運(yùn)輸,-20℃保存,有效期1年
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