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耐萬(wàn)古霉素腸球菌（Vancomycin-Resistant Enterococcus，VRE）又名萬(wàn)古霉素抗藥性腸球菌，是腸球菌屬下的一種細(xì)菌，有著對(duì)萬(wàn)古霉素這種抗生素的抗藥性。腸球菌是一種移生在腸道的革蘭氏陽(yáng)性球菌，故名腸球菌。在十九世紀(jì)末發(fā)現(xiàn)，早期歸為鏈球菌屬。在腸球菌屬中，對(duì)人類(lèi)有著病原性的有糞腸球菌（Enterococcus faecalis）及屎腸球菌（Enterococcus faecium）。而所有屎腸球菌更是有著抗藥性的，亦即所有屎腸球菌都是VRE。腸球菌屬的細(xì)菌主要是在腸內(nèi)，亦可以在人類(lèi)的消化道及尿道內(nèi)發(fā)現(xiàn)。VRE特別對(duì)免疫系統(tǒng)受損的人有危險(xiǎn)性，但是它令健康的人受感染則較少見(jiàn)。一般來(lái)說(shuō)可以引起心內(nèi)膜炎、敗血病及尿道感染等病癥。雖然相信有很大比例的雞只帶有VRE，但常見(jiàn)出現(xiàn)接觸的地方仍是在醫(yī)院（院內(nèi)感染）。因此快速檢測(cè)耐萬(wàn)古霉素腸球菌vanA/vanB具有重要的意義。本產(chǎn)品就是以探針?lè)╭PCR技術(shù)為基礎(chǔ)開(kāi)發(fā)的專(zhuān)門(mén)檢測(cè)耐萬(wàn)古霉素腸球菌vanA/vanB的試劑盒，它具有下列特點(diǎn)：
規(guī)格及成分
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成分 |
規(guī)格 |
包裝 |
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2×Probe qPCR MasterMix |
0.5mL |
0.5mL本色蓋 |
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熒光PCR專(zhuān)用模板稀釋液 |
1mL |
1.5mL綠蓋管 |
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耐萬(wàn)古霉素腸球菌vanA/vanB qPCR引物-探針干粉 |
50次 |
1.5mL棕色管 |
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耐萬(wàn)古霉素腸球菌vanA qPCR陽(yáng)性對(duì)照(1×10E7拷貝/μL) |
50μL |
0.5mL黃蓋管 |
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耐萬(wàn)古霉素腸球菌vanB qPCR陽(yáng)性對(duì)照(1×10E7拷貝/μL) |
50μL |
0.5mL白蓋管 |
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使用手冊(cè) |
1份 |
無(wú) |
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本產(chǎn)品采用五孔盒包裝 |
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注 意：引物-探針干粉在使用前需要短暫離心，然后在離心管中加入162uL的超純水充分混勻后再使用，未用完的需要-20℃保存。 |
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使用方法
稀釋耐萬(wàn)古霉素腸球菌vanA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)樣品 以陽(yáng)性對(duì)照10E1-10E6拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度
由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分。
1. 標(biāo)記6個(gè)離心管，分別為A6，A5，A4，A3，A2，A1。
2. 在A1-A6號(hào)管中各加入45μL熒光PCR專(zhuān)用模板稀釋液。
3. 在A6號(hào)管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(試劑盒提供)，充分震蕩1分鐘，得1×10E6拷貝/μL的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)PC樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭，在A5號(hào)管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩1分鐘，得1×10E5拷貝/μL的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭，在A4號(hào)管中加入5 μL 1×10E5拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩1分鐘，得1×10E4拷貝/μL的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)樣品。放冰上待用
6. 重復(fù)上面的操作得到A1-A6共六個(gè)稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)陽(yáng)性樣品。放冰上待用。
樣品DNA
低溫運(yùn)輸，-20℃保存，有效期2年
