購物車
幫助
021-54845833/15800441009
十足目虹彩病毒1型探針法LAMP試劑盒
產(chǎn)品及特點
十足目虹彩病毒1型（Decapod Iridescent Virus 1,DIV1），又叫蝦虹彩病毒，是近幾年來威脅羅氏沼蝦養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)的重要病害之一，可感染南美白對蝦、羅氏沼蝦、紅螯螯蝦等蝦類，且具有不同的外觀癥狀。其中，在羅氏沼蝦上，典型的特征是額劍基部甲殼出現(xiàn)一塊白色三角形區(qū)域，稱為“白點”，部分蝦有空腸空胃、肝胰腺萎縮等癥狀。在水產(chǎn)研究所長期性病原監(jiān)測的過程中發(fā)現(xiàn)，蝦虹彩病毒攜帶率較高，具有感染性強、致死率高的特點，且呈現(xiàn)出逐年增長的趨勢。因此對十足目虹彩病毒1型的快速準確鑒定有重要意義。本公司根據(jù)獨自開發(fā)的探針法LMAP技術(shù)，開發(fā)了簡單快捷的十足目虹彩病毒1型探針法LAMP檢測試劑盒，它具有下列特點：
十足目虹彩病毒1型（Decapod Iridescent Virus 1,DIV1），又叫蝦虹彩病毒，是近幾年來威脅羅氏沼蝦養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)的重要病害之一，可感染南美白對蝦、羅氏沼蝦、紅螯螯蝦等蝦類，且具有不同的外觀癥狀。其中，在羅氏沼蝦上，典型的特征是額劍基部甲殼出現(xiàn)一塊白色三角形區(qū)域，稱為“白點”，部分蝦有空腸空胃、肝胰腺萎縮等癥狀。在水產(chǎn)研究所長期性病原監(jiān)測的過程中發(fā)現(xiàn)，蝦虹彩病毒攜帶率較高，具有感染性強、致死率高的特點，且呈現(xiàn)出逐年增長的趨勢。因此對十足目虹彩病毒1型的快速準確鑒定有重要意義。本公司根據(jù)獨自開發(fā)的探針法LMAP技術(shù)，開發(fā)了簡單快捷的十足目虹彩病毒1型探針法LAMP檢測試劑盒，它具有下列特點：
1. 即開即用，用戶只需要提供DNA樣品。
2. 恒溫擴增，反應設置更加簡單。
3. 含熒光探針，可以對擴增進行實時熒光檢測（需要熒光PCR儀）。
4. 檢測靈敏性一般比PCR高10倍以上。
5. 特異性高，根據(jù)十足目虹彩病毒1型保守序列設計的4條特異引物和1條探針，不會跟其他生物的DNA發(fā)生交叉反應。
6. 一般30分鐘內(nèi)出結(jié)果，比PCR快。
7. 上樣量大，對20 μL的反應體系，樣品加樣量高達到14 μL。
8. 內(nèi)含的dUTP-UNG可防交叉污染。
9. 提供無傳染性的陽性對照，便于分析實驗結(jié)果。
10. 提供內(nèi)參，便于排除假陰性結(jié)果。
11. 本產(chǎn)品只能用于定性分析，不推薦用于定量分析。
12. 本產(chǎn)品足夠50次20 μL體系的探針法LAMP擴增。
13. 本產(chǎn)品只可用于科研。
規(guī)格及成分
|
成分 |
規(guī)格 |
包裝 |
|
4×LAMP MasterMix（探針法，待加酶） |
200μL |
0.5mL綠蓋管 |
|
Bst DNA聚合酶2.0 |
50μL |
0.5mL紅蓋管 |
|
20×十足目虹彩病毒1型探針法LAMP引物-探針混合干粉 |
50μL |
0.5mL棕蓋管 |
|
十足目虹彩病毒1型LAMP陽性對照(1×10E4拷貝/mL) |
250μL |
0.5mL黃蓋管 |
|
十足目虹彩病毒1型LAMP內(nèi)參對照(1×10E4拷貝/mL) |
250μL |
0.5mL紫蓋管 |
|
使用手冊 |
1份 |
無 |
|
本產(chǎn)品采購五孔盒包裝 |
||
|
注 意：引物探針混合干粉在使用前需要短暫離心，然后在離心管中加入55 μL的超純水充分混勻和再使用，未用完的需要-20℃保存。 |
||
使用方法
樣品DNA的制備
樣品DNA的制備
1. 用自選方法純化樣品DNA，本試劑盒跟市場上大多數(shù)DNA提取試劑盒兼容，包括本公司的免提取的核酸釋放劑。
2. 如果有N個樣品，則需要做N+2個樣品制備，包括一個樣品制備陽性對照（PC）和一個樣品制備陰性對照（NC）。PC用10 mL本試劑盒提供的樣品陽性對照（1×10E4拷貝/mL）和10 mL內(nèi)參陽性對照（1×10E4拷貝/mL）加一定量的水作為核酸提取陽性對照樣品，加水后的總體積必須跟核酸純化試劑盒所要求的起始樣本體積一致。NC用10 mL本試劑盒提供的10 mL內(nèi)參陽性對照（1×10E4拷貝/mL）加一定量的水充當，加水后的總體積必須跟核酸純化試劑盒所要求的起始樣本體積一致。
探針法LAMP反應20 mL體系
3. 反應設置：如果有N+2個DNA純化樣品，則設置N+4個LAMP擴增，增加的兩個反應分別是LAMP擴增陽性對照和LAMP擴增陰性對照。首次使用本試劑盒時，需要將Bst DNA聚合酶2.0全部加入到4×LAMP MasterMix（探針法，待加酶）中，輕柔顛倒混勻1分鐘后再使用。未用完的部分需要放-20℃保存。
4. 如果使用熒光定量PCR儀，則設置60次循環(huán)，每次65℃保溫1分鐘，采集FAM通道和HEX通道的熒光信號。
結(jié)果分析
1. 實驗有效性的判斷：樣品制備陽性對照和LAMP陽性對照的FAM信號（對應樣本）和HEX信號（對應內(nèi)參）必須有標準的S擴增曲線，樣品制備陰性對照的HEX信號（對應內(nèi)參）必須有標準的S擴增曲線，LAMP陰性對照的FAM信號和HEX信號必須呈現(xiàn)一條平線，沒有S曲線，否則提取實驗或擴增實驗無效。如果上述陽性對照和陰性對照結(jié)果正常，則實驗有效，可以分析樣品的情況。
待測樣品的結(jié)果判斷：在實驗有效的情況下，才有必要分析代測樣品管的熒光信號。如果其FAM
2. 熒光信號曲線為S型（無論HEX信號如何），則說明樣品為陽性。如果FAM熒光信號為平線則說明待測樣品為陰性。如果HEX熒光信號為S曲線，說明代測樣品（FAM曲線）為真陰性。如果HEX熒光信號也是平線，說明此樣品可能是假陰性，此樣品需要重復測試
自備試劑
樣品DNA，超純水
樣品DNA，超純水
運輸及保存
低溫運輸，-20℃保存，有效期1年
低溫運輸，-20℃保存，有效期1年
