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    • Nb2-11大鼠淋巴瘤細胞

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      • 品牌 : 通蔚生物
      • 目錄號 : TWC00971H
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    產品名稱 : Nb2-11大鼠淋巴瘤細胞

    產品貨號 :  Nb211
    中文名稱 :  大鼠淋巴瘤細胞 基本形態(tài) 淋巴母細胞樣
    培養(yǎng)環(huán)境 :  37℃,5%CO2,95%AIR
    生長特性 :  懸浮
    培養(yǎng)條件 :  RPMI-1640+10% FBS+10% HS+1% P/S
    細胞復蘇
    1、從液氮中取出細胞凍存管(注意:佩戴防爆管面具),快速將其置入 37℃水浴中解凍, 直至凍存管中無結晶,然后用 75%的酒精擦拭凍存管外壁。
    2、將凍存管中的細胞移至含 5ml 完全培養(yǎng)基的 15ml 離心管中,1000rpm 離心 5min。
    3、棄上清,沉淀用 5-8ml 完全培養(yǎng)基重懸,接種 T25 培養(yǎng)瓶,于細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
    4、第二天,換用新鮮完全培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
    細胞傳代
    1、細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時,棄T25培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用PBS清洗細胞一次。
    2、添加0.25%胰蛋白酶消化液約1-2ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后加入5ml完全培養(yǎng)液終止消化,再輕輕吹打細胞使之脫落,然后將懸液轉移至15ml離心管中,1000rpm離心5min。
    3、棄上清,沉淀細胞用 1-2ml 完全培養(yǎng)基重懸,然后按 1:2 比例進行分瓶傳代(兩個 T25), 補充新的完全培養(yǎng)基至5-8ml/瓶,放入細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
    細胞凍存
    1、細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的 80%面積時,棄T25培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用PBS清洗細胞一次。
    2、添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后加入5ml完全培養(yǎng)液終止消化,再輕輕吹打細胞使之脫落,然后將懸液轉移至15ml離心管中,1000rpm離心5min。
    3、棄上清,沉淀細胞每100萬加入1mL凍存液,混勻后加入凍存管中。
    4、 將凍存細胞用程序降溫盒放入-80℃冰箱即可;如后期要將細胞轉入液氮罐中,需在-80℃冰箱存放24小時以上。
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