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    品質保證 · 通蔚試劑

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    • 柑橘黃龍病菌亞洲種PCR試劑盒

      規(guī)格:
      • 品牌 : 通蔚生物
      • 目錄號 : TW37544
      • 應用 : 僅供科研使用
      • 貨期 : 現貨
      • 規(guī)格 :50次
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    產品及特點:
    柑橘黃龍病菌亞洲種(Candidatus Liberobacter Asiaticus)是一種類菌體,柑橘感染黃龍病后,全年均可發(fā)生,一般以夏梢和秋梢發(fā)病最多,其次是春梢。新梢的癥狀是葉片表現黃化和黃綠相間的斑駁。在葉片凋落后,枝梢上新長出的葉片表現缺素狀的花葉。病梢變短、生勢衰弱,病葉黃厚、變小,且易脫落,形成枯枝。開花不適時,花開的多、落得多。果小而畸形,或紅鼻果。后期,根部往往表現為小根腐爛。此菌可以侵染蕓香科柑橘屬和金橘屬植物,引發(fā)癥狀。通過菟絲子,此菌可以侵染長春花。在自然界,蕓香科蠔殼刺屬和木蘋果屬植物可能受此菌侵染,九里香屬植物常見著生大量傳播柑橘黃龍病的柑橘木虱,但其體內未見病原菌。本產品是根據 PCR 原理開發(fā)的柑橘黃龍病菌亞洲種的檢測試劑盒,
    1. 即開即用,用戶只需要提供DNA模板。
    2. 引物經過精心優(yōu)化,專一性強,只擴增柑橘黃龍病菌亞洲種,與其他病原沒有交叉反應。
    3. 提供陽性對照,便于區(qū)分假陰性樣品。
    4. PCR mix 中含上樣染料,PCR后可以直接上樣電泳。
    5. 本試劑盒足夠做40μL體系的PCR 50次,但只能用于科研。
    規(guī)格及成分:

    編號

    成分

    規(guī)格

    試劑一

    PCR MagicMix 3.0

    1 mL(紅蓋)

    試劑二

    超純水

    1 mL(亮黃色)

    試劑三

    柑橘黃龍病菌亞洲種 PCR 引物混合液

    100 μL(白蓋)

    試劑四

    柑橘黃龍病菌亞洲種 PCR 陽性對照(1×10E8 /μL)

    50 μL(黃蓋)

    試劑五

    使用手冊

    1 份

    運輸及保存:
    低溫運輸,-20℃保存,保存期限為一年。陽性對照需要單獨放置,不要污染其他試劑。
    自備試劑:
    樣品 DNA。
    使用方法:
    一、樣品 DNA 的制備:
    1. 用自選方法純化N+2個樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數核酸提取試劑盒兼容??梢赃x用本公司柱式病毒 DNAout。
    2. 如果有N個樣品,則需要做N+2個提取,包括一個樣品制備陽性對照和一個樣品制備陰性對照。樣品制備陽性對照是在適量水(取決于試劑盒要求的樣品起始量)中加 10μL 柑橘黃龍病菌亞洲種 PCR 陽性對照的 1000 倍稀釋液而得,樣品制備陰性對照是直接用水。提取結束后最后得到模板 DNA 放冰上待用。
    二、設置 PCR 反應(40μL 體系):
    3. 對N+2個樣品,在PCR時需要增加一個PCR陽性對照和一個PCR陰性對照,故需要設置N+4個反應。在N+4個PCR管中分別加入下列成分:

    成份

    N+2 個樣品管

    PCR 陰性對照

    PCR陽性對照

    PCR Magic Mix 3.0

    20μL

    20μL

    20μL

    柑橘黃龍病菌亞洲種PCR 引物混合液

    2μL

    2μL

    2μL

    N+2個樣品DNA模板

    18μL

    --

    --

    PCR 陰性對照(水)

    --

    18μL

    --

    PCR 陽性對照(柑橘黃龍病菌亞洲種PCR陽性對照1000倍稀釋液)

    --

    --

    18μL

    4. 按下表設置 PCR 反應:

    過程

    溫度

    時間

    預變性

    95℃

    5 min

        PCR 反應35個循環(huán)

    95℃

    30 sec

    55℃

    30 sec

    72℃

    40 sec

    最后延伸

    72℃

    7 min

    三、電泳檢測:
    5. 取 10-20 μL PCR 產物。電泳檢測 PCR 產物。本產品提供的 PCR Mix 在 擴增結束后可以直接上樣,不需要另外再加 loading buffer。PCR 產物陽 性對照必須有 551bp 大小的條帶出現,陰性對照必須無任何擴增,否則實 驗無效。對沒有擴增產物的樣品,可以稀釋 10 倍后重復 PCR 擴增以排除 PCR 抑制劑的感染。
    四、特別提示:
    本公司的所有產品,僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
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