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293T/17人胚腎細胞
基本信息
產(chǎn)品品牌 ：通蔚生物
中文名稱 ：人胚腎細胞
細胞簡稱 ：293T /17
細胞別稱 ：HEK 293T /17;293T /17
細胞形態(tài) ：上皮細胞樣
生長特性 ：貼壁細胞
培養(yǎng)環(huán)境 ：空氣，95% ；CO2，5% 37℃
凍存條件 ：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40% FBS+5% D M SO液氮
完全培養(yǎng)基 ：DM EM (PM 150210)＋10% F B S(164210-50)＋1% P /S(P B 180120)
傳代步驟
1、吸出原培養(yǎng)液。
2、加入2ml左右PBS，輕輕晃動培養(yǎng)瓶潤洗細胞,吸出PBS丟棄。
3、加入1ml左右0.25% 胰蛋白酶溶液（含ED TA ），輕輕晃動培養(yǎng)瓶使之浸潤所有細胞。
4、放入培養(yǎng)箱消化，顯微鏡下看到細胞塊中間的細胞明顯變圓有間隙時可終止，全程不要拍打培養(yǎng)瓶。
5、加入3ml含血清的培養(yǎng)基終止消化，吹打細胞使之脫壁并在液體里反復(fù)吹打使細胞盡量呈單顆細胞的懸浮液。
6、收集細胞懸液離心，1200rpm /min 3分鐘，離心完吸出上清丟棄。
7、加入新鮮培養(yǎng)基，吹打幾下混勻細胞即可，按比例接種到新培養(yǎng)瓶，補足培養(yǎng)基，擰松瓶蓋或使用透氣瓶蓋進行培養(yǎng)。
消化時間 ：0.5~ 1分鐘
換液頻次 ：2~ 3次/周
傳代比例（密度） ：1:3-1:4
收貨注意事項
若收到細胞大片脫落，請按照如下處理方式處理
1、將培養(yǎng)瓶內(nèi)所有培養(yǎng)基 轉(zhuǎn)入無菌離心管，離心收集細胞（1200rpm 3min）去除舊培養(yǎng)基。
2、用 PBS 重懸細胞，將所有細胞收集到一個離心管中，再次離心（1200rp m 3min）去除PBS。
3、加入1ml左右0.25% 胰酶重懸細胞，混勻即可，不能吹打太多次，放入培養(yǎng)箱消化3分鐘。
4、消化好后，用移液槍輕輕吹打細胞懸液，使細胞團分散，迅速加入3-5ml含血清的培養(yǎng)基混勻以終止消化，離心（1200rpm3min）去除胰酶。
5、加入5ml左右的細胞相應(yīng)的完全培養(yǎng)基混勻，按比例接入無菌培養(yǎng)瓶/皿中（首次傳代推薦1:3）。
細胞背景描述
293T /17細胞株是293T 細胞株的衍生株，293T 是293 [H EK -293]細胞株插入了SV 40 T-antigen的溫度敏感基因形成的高轉(zhuǎn)衍生株。293T細胞進行克隆，檢測pBN D 和pZ A P載體，得到一株能生成高滴度感染逆轉(zhuǎn)錄病毒的衍生株293T /17細胞。293T /17細胞持續(xù)表達猿病毒40(SV 40)大T 抗原，而因其高轉(zhuǎn)染能力篩選到17號克隆。293T /17細胞用pC RIPenv-和pC RIPgag-2載體轉(zhuǎn)染得到A N JO U 65細胞株，A N JO U 65細胞再用pC R IPgag-2和pG PT 2E載體轉(zhuǎn)染得到親宅性外殼表達細胞株BO SC 23。A N JO U 65細胞用攜帶gpt抗性基因的pC RIPA M gag載體轉(zhuǎn)染得到Bing雙向性表達包裝細胞株。
供體年齡 ：胚胎
組織來源 ：腎
細胞類型 ：轉(zhuǎn)化細胞系
生物安全等級 ：2
細胞保藏中心 ：ATCC ; C R L-11268
收到常溫細胞后如何處理
細胞培養(yǎng)詳細操作步驟請參照通蔚生物細胞培養(yǎng)操作指南
1. 收到常溫細胞后，及時拍照記錄有無漏液/瓶身破損現(xiàn)象。
2. 用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。?、細胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4. 靜置完成后，取出細胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細胞狀態(tài)（所拍照片 將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。
5. 若觀察到異?；蛘邔毎幸蓡枺埣皶r跟我們聯(lián)系；對于細胞培養(yǎng)操作及培養(yǎng)?？筛覀兊募夹g(shù)支持交流。
售前須知
該細胞貼壁松散，操作時請盡量輕柔；換液時需預(yù)熱培養(yǎng)基；收貨如有大塊脫落的細胞團，為正?，F(xiàn)象，請按照收貨注意事項處理。
